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        二氧化碳培養箱如何正確使用以延長其壽命
        點擊次數:48 發布時間:2021-06-16 打印本頁面 返回
          二氧化碳培養箱如何正確使用以延長其壽命
          大多數細胞在培養過程中需要37℃、5%CO2濃度及飽和濕度的生長條件,二氧化碳培養箱則提供了良好的生長環境。現在國內大部分的生物實驗室都采用熱導法培養箱,每臺培養箱耗資4.5萬~5.5萬元,使用壽命10年。根據報廢維修資料顯示,平均使用壽命為6.5年,主要原因是傳感器的損壞。CO2培養箱價格昂貴,我們希望它能按時或遲交服務,為正確使用,根據其結構和性能要求,現介紹培養箱正確使用方法,以及常見故障的預防與處理。
          一、溫度傳感器的保護
          培養箱溫度由溫度傳感器控制,其正常工作要求室溫條件為25℃。在一般情況下,將1~2支水銀溫度計放在箱內作為溫度對照。正確地操作溫度傳感器,使設定溫度數,箱面顯示數,箱內溫度保持一致。在室溫超過30℃時,溫度傳感器的調節功能失效,出現箱體表面顯示溫度高于設定值,箱體內部溫度又高于設定值,且常伴有警告聲。白天發生這種現象,降低室溫,使培養箱溫度恢復正常。如果在夜間發生,持續的高溫會導致細胞死亡。為了防止這種現象,在夏季使用培養箱時,無菌室應保持室溫約25℃。
          二、氣敏保護
          氣敏元件主要是控制箱內氣壓的變化。二氧化碳傳感器的正常反饋要求:進氣壓力為0.06兆帕。打開門后,箱內的氣體消失,壓力降低。關閉后,CO2傳感器在低壓刺激下有節奏地關閉,緩慢向箱內充氣,當進氣壓力達到0.06兆帕時,自動停止調節。換氣瓶時,部分實驗人員為了提高進氣量,用0.1帕甚至0.2兆帕壓力快速充氣,無形中破壞了CO2傳感器。當然這種損傷效應無法顯示,實驗者無法察覺,反復的錯誤操作,CO2傳感器損傷累積最終致命的損害,使氣壓調節失效。當實驗人員發現培養基顏色異常,細胞生長緩慢,才發現已經造成無法挽回的損傷。一個氣敏傳感器要16000元,換一個也不容易。CO2傳感器的使用壽命與CO2進氣壓力的大小有關,只要對CO2傳感器進行適當的壓力調節,就可以保護其性能。為了更好地調節壓力,本文將壓力調節歸納為4句話17個字:反時針松捍,接氣瓶,順時針減壓,壓力0.06。安民告示,貼在門上,以便于每個實驗人員都能正確安全操作。為了防止漏氣,在氣瓶出口處填上膠皮,在氣壓表接處纏上封條,氣瓶與氣壓表接合后,用肥皂水進行氣密性測試,當看到接口處沒有氣泡產生時便為合格。
          三、CO2零點漂移監測:
          在使用培養箱的過程中,CO2壓力零點會出現自然漂移,這一現象在箱面氣體顯示框中無法看到,實驗人員也很難察覺到漂移結果,細胞培養液顏色異常,細胞生長緩慢甚至死亡。二氧化碳氣壓的零點是否漂移,可以通過CO2氣體檢測儀,取箱檢查氣體來確定。例如,我們測試了6個培養箱,其顯示值均在5%左右,測試結果是2個培養箱內、外氣壓值一致,其余4個培養箱內、外氣壓值最高,最高為18%,最低為0.5%,這些異常氣壓值對細胞實驗結果有影響。為此,實驗室應建立CO2氣壓零點測試系統,該系統一般每3個月測試一次,以確保CO2氣壓實際使用值正確。
          四、培養箱濕度監測
          二氧化碳培養箱在使用過程中,需要在培養箱托盤上放入一定量的殺菌水(3/2至全盤),使培養箱處于濕度飽和的環境中,這是為了滿足開放培養細胞的要求。由于在飽和濕度的環境下培養液中的CO2不會發生逃逸,使培養液的pH值趨于穩定,有利于細胞的生長。實驗中,由于實驗人員經常忘記補水,使培養的細胞經常處于低濕甚至干燥的高溫環境中,導致培養液中的CO2氣體易揮發,液體pH升高,影響細胞生長。為了防止此類情況的發生,我們采用了箱面大字警示與值日生責任制度相結合的辦法,使這一措施得到了很好的落實。另外,針對箱內濕熱環境易感染細菌等問題,我們采用在1000ml水中加入2ml新潔爾滅液,對箱內空氣進行定期消毒,對培養物進行酒精消毒,以降低箱內微生物感染速度。在實驗中,培養基分區存放,培養物用筐或瓷盤存放,這樣能快速存取,縮短開門時間,減少箱內氣體和濕度的變化,節省氣體,穩定細胞生長環境。
          如前所述,二氧化碳培養箱在使用過程中,只要做好室溫、濕度和CO2氣壓的零點試驗及校正工作,就可以保證CO2培養箱的正常運轉,使其成為培養細胞舒適的搖籃。
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